න්යෂ්ටික අම්ල සංස්ලේෂණය සිදු කරනු ලබන්නේ ඝන අවධියේ සියැලික් ඇමයිඩ් ට්‍රයිග්ලිසරයිඩ් ක්‍රමය භාවිතයෙන් වන අතර එමඟින් DNA හි 3′ අන්තය ඝන අවධි උපස්ථරයක් මත නිශ්චල කර අපේක්ෂිත DNA කොටස සංස්ලේෂණය වන තෙක් 3′ සිට 5′ දක්වා දිශාවට නියුක්ලියෝටයිඩ එකතු කරනු ලැබේ. .මෙය DNA සංස්ලේෂණයට වඩා DNA පොලිමරේස් යෙදීමෙන් වෙනස් වේ.
පළමු පාදයේ 3′ අවසානය සංස්ලේෂණය අතරතුර CPG මත නිශ්චල වේ, ඊළඟ පාදයේ 5′-OH di-p-tolyl trityl DMT මගින් ආරක්ෂා කර ඇත, පාදයේ ඇති ඇමයිනෝ කාණ්ඩය බෙන්සොයික් අම්ලය සහ 3′ මගින් ආරක්ෂා කෙරේ. -OH පසුව ඇමයිනෝ පොස්පේට් සංයෝගයක් සමඟ සක්‍රීය වේ.1 පාදයේ 5 5′-OH හි 1 පාදය සහ ඊළඟ පාදයේ 3′-OH ෆොස්ෆයිට් ට්‍රයිග්ලිසරයිඩ් සාදයි, එය පසුව අයඩීන් සමඟ පොස්පේට් ට්‍රයිග්ලිසරයිඩයකට ඔක්සිකරණය වේ, 5′-OH පාදයේ ඇති ආරක්ෂකයා ඉවත් කරනු ලැබේ. මීළඟ පාදය එකතු කිරීම හරහා ඩයික්ලෝරෝඇසිටික් අම්ල DM චක්‍ර එකතු කිරීම සහ සංශ්ලේෂණයෙන් පසු 5′-OH හි ආරක්‍ෂකය දුර්වල අම්ලයක් සමඟ ඉවත් කරනු ලැබේ, එම කොටස සාන්ද්‍රිත ඇමෝනියම් හයිඩ්‍රොක්සයිඩ් සමඟ ඝන දුම්මලයෙන් විසන්ධි කර, ආරක්‍ෂකය පාදයෙන් ඉවත් කරනු ලැබේ. උනුසුම් වීම යටතේ සාන්ද්‍ර ඇමෝනියම් හයිඩ්‍රොක්සයිඩ් සමඟ, ඇමෝනියම් හයිඩ්‍රොක්සයිඩ් ඉවත් කරනු ලැබේ, ඛණ්ඩනය රික්ත වියළනු ලැබේ, සහ න්යෂ්ටික අම්ලය ද්‍රව වර්ණදේහ හෝ PAGE මගින් පවිත්‍ර කරනු ලැබේ.
ඔලිගෝ සංශ්ලේෂණයේ පියවර
අවහිර කිරීම
එම5 end DMT ආරක්ෂණ කණ්ඩායම TCA විසඳුම එකතු කිරීමෙන් ඉවත් කරනු ලැබේ.
සක්රිය කිරීම
සක්‍රීය ඔලිගොනියුක්ලියෝටයිඩ මොනෝමර් අතරමැදි සෑදීම සඳහා ඔලිගොනියුක්ලියෝටයිඩ් මොනෝමරය සමඟ සක්‍රියකාරකය මිශ්‍ර කිරීම.
සම්බන්ධ කිරීම
5-පර්යන්ත හයිඩ්රොක්සයිල් කාණ්ඩය සක්‍රීය ඔලිගොනියුක්ලියෝටයිඩ අතරමැදි සමඟ ප්‍රති-ජනක ඝනීභවන ප්‍රතික්‍රියාවක දී ප්‍රතික්‍රියා කර අස්ථායී ෆොස්ෆයිට් ට්‍රයිග්ලිසරයිඩ් බන්ධනයක් සාදයි.
ආවරණ කිරීම
ආවරණ කාරකයක් එකතු කිරීම ඝනීභවන ප්රතික්රියාවට සම්බන්ධ නොවන අතිරික්ත හයිඩ්රොක්සයිල් කාණ්ඩ සමඟ ඇසිටිලේෂන් ආවරණ ප්රතික්රියාවක් සිදු කරයි.
ඔක්සිකරණය
ජලය අඩංගු අයඩින් ද්‍රාවණය එකතු කිරීම ඔක්සිකරණය මගින් අස්ථායී ෆොස්ෆයිට් බන්ධන සමඟ ප්‍රතික්‍රියා කර ස්ථායී පොස්පරික් අම්ල ට්‍රයිග්ලිසරයිඩ් බන්ධන සාදයි.
සයනොයිතයිල් ක්ලීවේජ්
පොස්පේට් ට්‍රයිග්ලිසරයිඩ් බන්ධනයෙන් සයිනොඑතිල් කාණ්ඩය ඉවත් කිරීම සඳහා DEA ද්‍රාවණය එකතු කිරීමත් සමඟ සංශ්ලේෂණයෙන් පසු න්යෂ්ටික අම්ල නිෂ්පාදනය.
Cleaved & Deprotection
න්යෂ්ටික අම්ල කොටස් සාන්ද්‍රිත ඇමෝනියම් හයිඩ්‍රොක්සයිඩ් ද්‍රාවණයක් එකතු කිරීමෙන් ඝන අවධි වාහකයෙන් වෙන් කර පසුව පාදවල හයිඩ්‍රජන් බන්ධනවලින් ආරක්ෂිත කණ්ඩායම් ඉවත් කිරීම සඳහා රත් කරනු ලැබේ.
පසු කාලය: නොවැම්බර්-21-2022