DNA සංස්ලේෂණයේ මූලික මූලධර්මය

රසායනික DNA සංස්ලේෂණය ඝන-අදියර සංස්ලේෂණ උපාය මාර්ගය සහ ෆොස්ෆොරමිඩයිට් රසායනය මත පදනම් වේ.ජීව විද්‍යාත්මක DNA සංස්ලේෂණයට වඩා වෙනස්ව, රසායනික DNA සංස්ලේෂණයේ ද්‍රව්‍යය වන්නේ DMT (4, 4-dimethoxytrityl) සහ ෆොස්ෆොරමිඩයිට් නවීකරණය කරන ලද deoxyriboxyside, රූප සටහන 1. DNA සංස්ලේෂණය ඝන ආධාරකයක් මත සිදු කෙරේ (අපට විවිධ දේ ඉදිරිපත් කළ හැක.ඔලිගෝ සංශ්ලේෂණ තීරුව), එනම් CPG (පාලිත සිදුරු වීදුරු) සහ PS (පොලිස්ටිරින්), සහ සම්පූර්ණ සංශ්ලේෂණය සිදු කරනු ලබන්නේ aDNA/RNA සංශ්ලේෂකය, අපගේ ප්‍රධාන උපකරණය වන, විවිධ මාදිලියේ ඇත: HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 සහ යනාදිය, සංශ්ලේෂණ දිශාව 3' සිට 5' දක්වා වන අතර, නියුක්ලියෝටයිඩයක් ඝන ආධාරකයට හඳුන්වා දෙනු ලැබේ. සංශ්ලේෂණ චක්රය.සාමාන්‍යයෙන් සංශ්ලේෂණ චක්‍රයක පියවර හතරක් අඩංගු වේ, ඉවත් කිරීම, සම්බන්ධ කිරීම, ආවරණ කිරීම සහ ඔක්සිකරණය (රූපය 2).Deprotection ඝන ආධාරකයේ DMT කාණ්ඩය හෝ පෙර නියුක්ලියෝසයිඩ් මත 5' හයිඩ්‍රොක්සයිල් කාණ්ඩය ඉවත් කිරීමට සකසා ඇත, ඩයික්ලෝරෝමීතේන් හි 3% ට්‍රයික්ලෝරෝඇසිටික් අම්ලය ප්‍රතික්‍රියාකාරකය ලෙස භාවිතා කරයි.එවිට ෆොස්ෆොරමයිඩයිට් වෙනස් කරන ලද ඩිඔක්සිරයිබොක්සයිඩ් සක්‍රියකාරකයේ ආධාරයෙන් හයිඩ්‍රොක්සයිල් කාණ්ඩයට නිරාවරණය කිරීමට ඉඩ දී ඇත, එනම් 5-එතිල්තියෝටෙට්‍රාසෝල් හෝ 4, 5-ඩයිසිනොයිමිඩසෝල්, ෆොස්ෆයිට්‍රයිස්ටර් (III) සාදමින් සහ සම්බන්ධ කිරීමේ පියවර අවබෝධ කර ගත්තේය.සම්බන්ධ කිරීමේ පියවරේදී ප්‍රතික්‍රියා නොකළ හයිඩ්‍රොක්සයිල් කාණ්ඩය අවහිර කිරීමට, අනවශ්‍ය දෝෂ අනුපිළිවෙලවල් ඇතිවීම අවම කිරීමට ආවරණ පියවරක් සිදු කෙරේ.අවසාන වශයෙන්, අස්ථායී ෆොස්ෆයිට්‍රයිස්ටර් (III) පයිරිඩීන් වත්මන් ඔක්සිකාරකයක් ලෙස අයඩීන් සමඟ රසායනික ස්ථායී ෆොස්ෆෝට්‍රයිස්ටර් (V) බවට ඔක්සිකරණය වේ.

සංස්ලේෂණය කරන ලද DNA ඇමයිනොලිසිස් මගින් ඝන ආධාරකයෙන් කැඩී යාමක් විය හැකිය, ෆොස්ෆෝට්‍රයිස්ටරයේ 2-සයනොඑතිල් ආරක්ෂිත කණ්ඩායම සහ නියුක්ලියෝබේස් මත ඇති ඇමයිඩ් එකවර කැඩී යයි, රාක්කවල ඇති සංශ්ලේෂණ තහඩු සහ සංශ්ලේෂණ තීරු සෘජුවම ප්‍රතික්‍රියා කුටියේ තබා ඇත. හිආරක්ෂණ උපකරණ.ඉල්ලුම මත HPLC, electrophoresis සහ OPC මගින් බොර DNA සකස් කළ හැක, අපට ඔබට ලබා දිය හැකපිරිසිදු කිරීමේ උපකරණපශ්චාත් සැකසුම් සඳහා.